Testni laboratorij podružnice zvezne državne proračunske ustanove "Rosselkhozcenter" na Krasnojarskem ozemlju je začel novo vrsto raziskav - odkrivanje in identifikacijo gensko spremenjenih organizmov (GSO) z verižno reakcijo polimeraze v realnem času.
Na ozemlju Ruske federacije prisotnost GSO v krmi in živilskih zrnih urejajo tehnični predpisi carinske unije TR TS 015/2011 "O varnosti žita", oziroma nadzor vsebnosti GSO v žito je obvezno. Tudi v skladu z zakonom o semenarstvu (Zvezni zakon št. 17.12.1997-FZ z dne 149. decembra 11, spremenjen 2021. junija XNUMX) je prepovedano uporabljati semena rastlin za setev (sajenje) v Ruski federaciji, genetski program, ki je bil spremenjen z genskimi metodami. Trenutno je bil sprejet nov zakon "O pridelavi semen" št. 454-FZ (začne veljati 1. septembra 2023), v skladu s katerim je treba ves semenski material testirati na vsebnost GSO.
Gensko spremenjeni organizem je živ organizem, katerega genotip je bil z genskim inženiringom umetno spremenjen, da bi mu dal želene lastnosti. V kmetijstvu se genski inženiring uporablja za ustvarjanje novih sort rastlin, ki so odporne na neugodne okoljske razmere in škodljivce, z boljšo rastjo in okusnimi lastnostmi.
Najbolj optimalna metoda za odkrivanje GSO v živilih in žitih je verižna reakcija s polimerazo (PCR) v realnem času. To je zelo občutljiva in visoko natančna metoda, ki temelji na večkratnem selektivnem kopiranju specifičnega segmenta nukleinske kisline DNA z uporabo encimov v umetnih pogojih (in vitro). PCR omogoča, da v testnem materialu najdemo majhen odsek genetske informacije, vsebovane v določenem zaporedju nukleotidov DNA katerega koli organizma med ogromnim številom drugih odsekov DNK, in ga večkrat pomnožimo.
V laboratoriju za testiranje podružnice Zvezne državne proračunske ustanove "Rosselkhozcenter" na Krasnojarskem ozemlju se ekstrakcija DNK iz rastlinskega materiala in PCR izvaja z uporabo najnovejše opreme, ki ustreza zahtevam organizacije PCR laboratorija. Amplifikacija (tvorba več kopij odsekov kromosomske DNK) se izvaja na ojačevalniku ANK-M, vključenem v register merilnih instrumentov sistema FSIS Arshin. Naprava je sestavljena iz termičnega bloka, ki vzdržuje temperaturo, potrebno za reakcijo in je programirana z vgrajenim mikroračunalnikom, opremljena pa je s fluorescenčnim detektorjem, ki registrira fluorescentni signal iz reakcijske zmesi za prikaz kopičenja produkta PCR.
PCR se izvaja z reagentnimi kompleti, ki imajo visoko (več kot 90-odstotno) učinkovitost reakcije PCR, visoko občutljivost in specifičnost za odkrivanje GSO, izpolnjujejo mednarodne zahteve za parametre meje detekcije (LOD) in meje kvantifikacije (LOQ). ), ki vsebuje interno pozitivno kontrolo (VPK), ki odpravlja lažno negativne rezultate.
Prva stopnja analize za odkrivanje GSO je GSO presejanje - celovita študija za odkrivanje rastlinske DNK in identifikacijo specifičnih genetskih elementov - določenih regulatornih zaporedij (promotorjev in terminatorjev) in genov. Če se najde kateri od teh elementov, se identificirajo gensko spremenjene linije določenih rastlinskih vrst.
V preskusnem laboratoriju podružnice Zvezne državne proračunske ustanove "Rosselkhozcenter" na Krasnojarskem ozemlju potekajo raziskave za identifikacijo GSO v živilskih in krmnih žitih ter v semenih kmetijskih pridelkov. Delo izvajajo strokovnjaki, ki so bili usposobljeni na temo "Osnove določanja GSO v rastlinskih proizvodih s PCR v realnem času" v Zveznem centru za ocenjevanje varnosti in kakovosti žita in proizvodov njegove predelave v moskovski regiji.
Tako so strokovnjaki laboratorija za testiranje uspešno osvojili novo sodobno in obetavno metodo za analizo rastlinskega materiala za vsebnost GSO. V prihodnje je predvidena vključitev te metode v obseg akreditacije preskuševalnega laboratorija preko sistema Rosaccreditation.